轉(zhuǎn)染是細(xì)胞在一定條件下主動(dòng)或被動(dòng)導(dǎo)入外源DNA片段而獲得新的表型的過(guò)程，從本質(zhì)上講和轉(zhuǎn)化沒(méi)有根本的區(qū)別。
轉(zhuǎn)染是什么意思
李燕郴副主任醫(yī)師
首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京朝陽(yáng)醫(yī)院血液科
2021-11-3031620次
轉(zhuǎn)染可分為兩大類(lèi)，一類(lèi)是瞬時(shí)轉(zhuǎn)染，一類(lèi)是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。
瞬時(shí)轉(zhuǎn)染是指外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中，因此一個(gè)宿主細(xì)胞中可存在多個(gè)拷貝數(shù)，產(chǎn)生高水平的表達(dá)，但通常只持續(xù)幾天，多用于啟動(dòng)子和其它調(diào)控元件的分析。一般來(lái)說(shuō)，超螺旋質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率較高，在轉(zhuǎn)染后24-72小時(shí)內(nèi)分析結(jié)果，常常用到一些報(bào)告系統(tǒng)如熒光蛋白，β半乳糖苷酶等來(lái)幫助檢測(cè)。
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是指外源DNA既可以整合到宿主染色體中，也可能作為一種游離體存在，盡管線(xiàn)性DNA比超螺旋DNA轉(zhuǎn)入量低但整合率高，外源DNA整合到染色體中概率很小，通常需要通過(guò)一些選擇性標(biāo)記反復(fù)篩選得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的同源細(xì)胞系。
無(wú)論是轉(zhuǎn)染還是轉(zhuǎn)化，其關(guān)鍵因素都是用氯化鈣處理大腸桿菌細(xì)胞，以提高細(xì)胞膜的通透性，從而使外源DNA分子能夠容易進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部。
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